1.3 统计学处理 采用记数资料的One-Way ANOVA分析方法计算，以P〈0.05为差异显著性标准。

2、结果

2.1 在体外培养的脐静脉内皮细胞有以下特点：（1）铺路石状单层梭形细胞，（2）接触抑制，（3）二型微丝，（4）细胞连接，（5）丰富的胞饮小泡。一般根据（1）、（2）项能准确区别EC与来自血管壁的平滑肌细胞及成纤维细胞。本实验所培养的HUVEC具有以上特征，可以认定为EC。

2.2 紫杉醇在体外对脐静脉内皮细胞生长的抑制

紫杉醇作用于人脐静脉内皮细胞的OD 值

紫杉醇浓度

OD 值

1

2

3

x±s

14nmol/l

0.25

0.26

0.28

0.26±0.015*

7 nmol/l

0.30

0.34

0.34

0.33±0.023*

3.5 nmol/l

0.51

0.46

0.49

0.49±0.025*

1 nmol/l

0.73

0.71

0.74

0.73±0.015

M199对照

0.75

0.76

0.72

0.74±0.021

注：方差齐性（P=0.776），各组间有显著差异（F=356，P=0）；*P<0.05 vs 对照。

2.3 紫杉醇在体外对人肝癌7721细胞在选定浓度下无抑制作用

紫杉醇作用于人肝癌7721细胞的OD 值

紫杉醇浓度

OD 值

1

2

3

x±s

14nmol/l

1.25

1.33

1.18

1.25±0.075

7 nmol/l

1.08

1.19

1.17

1.15±0.059

3.5 nmol/l

1.14

1.29

1.29

1.24±0.087

1 nmol/l

1.12

1.17

1.20

1.16±0.040

1640对照

1.10

1.10

1.27

1.16±0.098

注：方差齐性（P=0.394），各组间无显著差异（F=1.373，P=0.311）。

2.4 CAM结果分析：

不同浓度紫杉醇对鸡尿囊膜血管新生的影响

Taxel

14

Taxel

7

Taxel

3.5

Taxel

1

总数

10

10

10

10

10

阳性数

10

8

3

0

0

阳性率（%）

100

80

30

0

0

结论：化疗药物紫杉醇对鸡尿囊膜新生血管的抑制结果与对内皮细胞的抑制结果相一致。

3 讨论：

肿瘤生长是血管依赖的，肿瘤通过分泌某种因子促进了内皮细胞的增殖和毛细血管的形成，而新生血管通过营养控制影响着肿瘤的生长。在缺乏新生血管的情况下，肿瘤将被限制于2-3mm大小的静止状态(8)。抗血管治疗作为抗肿瘤治疗研究的热点领域，人们倾注了大量的努力，取得了一定的成果，许多具有抗血管活性的物质已被发现，但大多数仍停留于临床前研究，仅有少数几种药物如：抗血管生成因子endostatin、T -470批准进入临床应用。近年来，国外研究发现不少传统的细胞毒药物在低剂量（非细胞毒浓度）下表现出了抗血管生成的活性，如：长春碱在0.5、0.75和1 pmol/l显示了剂量依赖的抗血管活性(9)，环磷酰胺在10ug/ml浓度时可以诱导内皮细胞凋亡(10)。因此，研究传统化疗药物的抗血管生成作用不仅具有重要的理论意义，同时也具有临床实际应用价值。

本实验分别挑选了体内、体外两种典型的实验方法探讨紫杉醇对血管形成的影响。实验结果表明紫杉醇在体外可以抑制人血管内皮细胞的增殖，在体内可以抑制鸡胚尿囊膜血管的新生。其抑制作用可在3.5-14nmol/l的浓度下获得并呈剂量依赖性，当紫杉醇浓度低于1nmol/l时，对血管和内皮生长无明显影响。同时，在实验所选定的浓度下，紫杉醇在体外未能抑制肿瘤细胞的增殖；而在CAM体内实验中，以CAM-胚胎10g重量计算(11)，即使在最高浓度14nM下，只等效于0.24ug/kg，相当于70kg成人16.8ug紫杉醇的剂量，远远低于常规化疗剂量，提示：紫杉醇对新生肿瘤血管的抑制机理与其细胞毒作用不同，是紫杉醇在非细胞毒浓度下表现出的特殊能力，是紫杉醇抗癌机理的一个重要方面。这一结果与国外的研究结果相一致。如何利用紫杉醇的这一作用机制发挥其在抗肿瘤血管生成治疗中的作用值得临床进一步研究。至于紫杉醇抗血管形成的具体机制，我们推测与其诱导细胞凋亡、抑制促血管生成因子的分泌有关，但仍有待进一步探讨。

参考文献：

[1] Boehm-Viswanathan T. Why angiogenesis inhibition[J]? Int J Mol Med，1999，4(4):413-421.

[2] 周际昌. 实用肿瘤内科学[M]. 北京：人民卫生出版社，1999. 298-300.

[3] Schimming R, Hunter NR, Mason KA, et, al. Inhibition of tumor neo-angiogenesis and induction of apoptosis as properties of docetaxel (taxotere) [J]. Mund Kiefer Gesichtschir,1999, 3(4):210-218.

[4] 韩锐. 抗癌药物研究和实用技术[M]. 北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1997. 284-286.

[5] 陈龙邦，臧静，王靖华，等. β-榄香烯与顺铂及阿霉素对人胃癌细胞株细胞毒作用的协同效应[J]. 肿瘤防治研究 1997；24（3）：189-191

[6] 付生法. 检测血管形成因子作用的鸡胚尿囊膜技术[J

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